МИНИСТЕРСТВО
СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА
И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
(Минсельхозпрод России)

ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИИ

17.08.98г . n 13-7-2/1358

ВРЕМЕННОЕ НАСТАВЛЕНИЕ
по применению набора реагентов для
количественного определения корти
-зола в продуктах животного про-
исхождения методом иммуно ферментно-
го анализа ( ИФА-АФ-КОРТ.)
(В порядке широкого производствен-
ваний до 2001 года)
ного испытания на 1000 000 исследо-

1. НАЗНАЧЕНИЕ

Контроль качества продуктов животного происхождения ветеринарной службой является одним из важнейших профилактических мероприятий по сохранению здоровья нации. При оценке качества продуктов питания животного происхождения, одним из важнейших показателей является контроль уровня стероидных гормонов - мощнейших регуляторов обмена веществ в организме.

Причиной этого является их способность длительное время сохраняться в замороженных продуктах животного происхождения, выдерживать термическую обработку и свободно всасываться из содержимого желудочно-кишечного тракта. Стероидные гормоны не обладают видовой специфичностью, поэтому, попадая в организм человека, они активно вмешиваются в межгормональные взаимоотношения, нарушая тем самым присущий данному организму обмен веществ, влияя на проявление половых признаков и половую функцию организма.

В современном промышленном животноводстве, птицеводстве и рыбоводстве при интенсивных технологиях выращивания животных, в нарушение технологических регламентов, часто прибегают к незаконному использованию гормональных стимуляторов роста. Использование препаратов данного класса строго контролируется в развитых странах уполномоченными органами государственного надзора. Для этого в мировой практике активно используют экспресс-методы контроля безопасности пищевых продуктов, среди которых лидирующее положение занял иммуноферментный метод анализа. В США и некоторых странах ЕЭС методы иммуноферментного анализа продуктов животного происхождения доведены до статуса национальных стандартов.

В России из-за отсутствия эффективных, высокопроизводительных и простых в исполнении методов количественного определения стероидных гормонов до настоящего времени не осуществлялся эффективный контроль за содержанием гормональных препаратов в целом перечне продуктов животного происхождения, как отечественного, так и, в особенности, импортного производства.

ПЕРЕЧЕНЬ ПРОДУКТОВ ЖИВОТНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ, ПОДЛЕЖАЩИХ ИССЛЕДОВАНИЮ НА СОДЕРЖАНИЕ КОРТИЗОЛА.

1. Мясо : свежее, охлажденное и мороженое конины, говядины, свинины, баранины, козлятины, кролика, мясо других видов, блоки, мясные полуфабрикаты.

2. Мясо птицы: свежее, охлажденное и мороженое кур, уток, гусей, индеек, перепелов, индеек тяжелых кроссов.

3. Колбасы и кулинарные изделия из мяса (говядины, свинины, баранины, конины, субпродуктов) и птицы: колбасы сырокопченые, колбасы полукопченые, колбасы варено-копченые, колбасы вареные, сосиски, сардельки, колбасы и колбаски вареные для школьного питания из мяса и птицы, колбасы ливерные, колбасы кровяные, зельцы, паштеты, студни, соусы, мясные вареные, жареные, запеченные и копчено-запеченные продукты.

4. Консервы из мяса и птицы, консервы мясо-растительные.

5. Субпродукты сельскохозяйственных животных и птиц.

6. Полуфабрикаты.

7. Масло коровье, жиры животные.

8. Яйца и изделия пищевые на яичной основе.

9. Рыба и рыбопродукты, рыбные консервы.

10. Молоко, сливки, кисломолочные изделия, консервы молочные, молоко и молочные изделия сухие, сыры и творожные изделия, мороженое .

Разработанный ИфА-метод предназначен для решения проблемы массового рутинного контроля за содержанием кортизола, в том числе и на продуктовых рынках.

В основе количественного определения кортизола в продуктах животного происхождения лежит конкурентный вариант твердофазного иммуноферментного анализа. Принцип метода основан на конкуренции между адсорбированным на поверхности лунок планшета кортизолом и свободным (в калибровочной пробе или анализируемом образце) кортизолом за активные центры связывания аффинных антител к кортизолу, меченых пероксидаэой.

В результате иммуноспецифической реакции между антителами к кортизолу и самим кортизолом, содержащимся в пробах (стандарты или образцы) и на поверхности лунок планшета образуются комплексы антитела-кортизол. Комплекс антиген-антитело, не связанный с поверхностью планшета, удаляют путем промывки.

В результате ферментативной реакции пероксидазы с перекисью водорода субстратного раствора происходит окрашивание 3,3',5,5'-тетраметилбензидина (ТМБ) а синий цвет. Интенсивность окраски обратно пропорциональна содержанию кортизола в анализируемом образце. Реакцию останавливают добавлением серной кислоты, вызывающей смену окраски с синей на ярко желтую. Результаты реакции оцениваются на спектрофотометре вертикального сканирования при длине волны 450 нм.

2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА

2.1.Набор рассчитан на проведение анализа(6 калибровочных проб и 14 неизвестных проб в дубликатах на каждом планшете).

2.2.Состав набора:

1.Планшет 96-луночный с адсорбированным антигеном 1(2)шт

2.Калиброванные стандарты кортизола (бесцветная или желтоватая прозрачная жидкость по 0,5 мл):

а) Стандарт 0 нг/мл 1фл.

б) Стандарт 9,0 нг/мл 1фл.

в) Стандарт 30,0 нг/мл 1Фл.

г) Стандарт 90,0 нг/мл 1фл.

д) Стандарт 300,0 нг/мл 1Фл. е) Стандарт 720,0 нг/мл 1ФЛ.

3. Конъюгат аффинных антител к кортизолу и 1фл. пероксидазы из корня хрена ( жидкость красного или желтоватого цвета - 1,5 или 3 мл)

4. Калиброванный раствор кортизола - 400 мкг/мл 1фл. (бесцветная или желтоватая прозрачная жидкость - 3 или 6 мл)

5. Калиброванный раствор кортизола - 400 нг/мл) 1фл. (бесцветная или желтоватая прозрачная жидкость(3 мл)

6. Растворитель для анализируемых проб 1фл. (бесцветная прозрачная жидкость - 30 или 60 мл)

7. Буфер для анализа n 1 ( жидкость красного или 1Фл. желтоватого цвета - 3 или 6 мл)

8. Буфер для анализа n 2 ( жидкость красного или 1фл желтоватого цвета - 1,5 или 3 мл)

9. ФСБР - фосфатно-солевой буферный раствор с 1фл. детергентом, 20-кратный концентрат (бесцветная прозрачная жидкость - 25 или 50 мл)

10. 3,3',5,5'- тетраметилбензидин (ТМБ) 1фл. (прозрачная жидкость голубоватого цвета -2,2 или 4,4 мл)

11. Субстратный раствор (бесцветная прозрачная жидкость - 1фл. 8,8 или 17,6 мл)

12. Стоп-реагент (серная кислота, 2н) 1фл. (бесцветная прозрачная жидкость - 11 или 22 мл)

2.3.Маркировка.

2.3.1. На каждый флакон с компонентом должна быть наклеена этикетка с указанием: наименования предприятия-изготовителя и его товарного знака, названия набора, названия реагента, способа подготовки к работе ( для отдельных компонентов), условий хранения, срока годности, номера серии, объема реагента, надписи "Только для "ин витро" диагностики" , содержания кортизола (для калиброванных стандартов и растворов) .

2.3.2. На каждую коробку должна быть наклеена этикетка с указанием: наименования предприятия-изготовителя и его товарного знака, названия набора, состава набора, надписи "Только для "ин витро" диагностики", условии хранения, срока годности, номера серим, номера настоящих технических условий. В коробку вкладывают наставление по применению .

3.ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ

3.1. Транспортирование наборов производят в соответствии с ОСТ 08064-19-07 всеми видами крытого транспорта при температуре от 2 до 8° С. Допускается транспортирование наборов при температуре до 25° С в течение 1 сут.

3.2. Наборы хранят при температуре от 2 до 8° С в течении всего срока годности. Допускается хранение набора при температуре до 25° С не более 1 сут.

3.3. Срок годности набора - 6 мес. со дня изготовления.

4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

4.1. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как исследуемый материал является потенциально инфицированным, способным длительное время сохранять и передавать бактериальные или вирусные инфекции.

4.2. Химическая посуда и оборудование, которые используются в работе с набором, должны быть соответствующим образом маркированы и храниться отдельно.

4.3. Запрещается прием пищи, использование косметических средств и курение в помещениях, предназначенных для работы с наборами.

5. ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА

5.1. ПРОМЫВОЧНЫЙ БУФЕР

Перед использованием добейтесь полного растворения солей фосфат-но-солевого буферного раствора (ФСВР) путем прогревания флакона в горячей воде. Смешайте необходимое для работы количество ФСВР с дистиллированной водой в следующей пропорции: 1 часть ФСБР + 19 частей дистиллированной воды. Неиспользованный ФСБР храните при +4°С.

5.2. КОНЪЮГАТ

Рабочий раствор Конъюгата готовится непосредственно перед использованием и хранению, в отличие от исходного раствора, не подлежит. Для работы на целом планшете требуется 5 мл рабочего раствора Конъюгата. В зависимости от количества анализируемых проб, смешайте Буфер для анализа n1, Буфер для анализа n2 и Конъюгат в соотношении 2:1:1.Оставшиеся не использованными исходные растворы Конъюгата и Буфера для анализа n1 и n2 храните при + 4° С.

5.3. СТАНДАРТЫ И КАЛИБРОВАННЫЕ РАСТВОРЫ

Перед использованием стандарты, калиброванные растворы и растворитель для анализируемых проб следует прогреть для размораживания растворителя. Чистыми наконечниками перенесите по 60 мкл каждого стандарта и анализируемого образца в предварительно маркированные флаконы и добавьте по 390 мкл Промывочного буфера, перемешайте и используйте в ИФА. Исходные растворы храните при +4° С.

5.4. ХРОМОГЕН

Смешайте содержимое флаконов ТМВ и субстратного раствора в соотношении: 1 часть раствора ТМВ и 4 части субстратного раствора, перемешайте. Для работы с растворами хромогена необходимо использовать только чистую посуду и чистые наконечники.(Раствор готовится непосредственно перед употреблением). Оставшиеся неиспользованными растворы храните при + 4°С.

6.ПОДГОТОВКА ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА

Для определения истинной концентрации гормонов в каждом исследуемом образце необходимо оценить процент выхода дополнительно вносимых стероидов. Для этого каждый образец пробы исследуется как в чистом виде, так и с добавкой определяемого гормона. Во всех случаях, для анализа 1 исследуемой пробы, необходимо одновременно исследовать 2 пробы того же образца с добавками калиброванных растворов кортизола, вносимых внутрь образца до гомогенизации (экстракции) и после экстракции.

Все работы по экстракции исследуемых образцов необходимо проводить в вытяжном шкафу.

Продукты из мяса. птицы, рыбы. сыр. творог.

1. Берется усредненная навеска из разных мест исследуемого образца массой 40 г, которая делится на 2 части по 20г каждая. В одну из частей вносится 20 мкл калиброванного раствора кортизола, содержащего 400 мкг/мл гормона для оценки эффективности экстракционной процедуры.

2. Исследуемые пробы тщательно гомогенизируются до мелкодисперсного состояния в 40 мл 0,1 n раствора соляной кислоты каждая.

3. По 3 г полученных гомогенатов переносят в полиэтиленовые пробирки и добавляют тройной по отношению к гомогенату объем дизтилового эфира (9 мл), плотно закрывают крышками, тщательно встряхивают в течение 5-10 минут и выдерживают в морозильной камере или сухом льде до замерзания водной (нижней) фазы.

4.Прозрачную эфирную фазу каждого образца аккуратно сливают в пенициллиновые флаконы и выпаривают досуха на водяной бане с температурой воды +37° С в вытяжном шкафу(необходимо следить, чтобы эфир не выплескивался).

5. К прогретым (+56° С) сухим остаткам экстрактов добавляют по 1 мл растворителя для анализируемых проб. Пробы тщательно перемешивают в течение 2-3 минут и охлаждают 15 минут при +4° С.

6. Очистка образцов от жира производится путем фильтрации через бумажные фильтры.

7. Пронумеруйте 3 чистых флакона: 1- x1; 2- y1; 3- z1.

- в 1-й внесите 60 мкл фильтрата, полученного после экстракции нативного анализируемого образца (x1);

- во 2-й внесите 60 мкл фильтрата анализируемого образца с добавкой гормона, внесенного до экстракции (y1) ;

- в 3-й (z1) внесите 60 мкл фильтрата, полученного после экстракции нативного анализируемого образца (x1); сюда же добавьте 60 мкл калиброванного раствора кортизола, содержащего 400 нг/мл гормона ;

- в 1 и 2 флаконы внесите по 390 мкл Промывочного буфера, в 3-й внесите 330 мкл Промывочного буфера, осторожно встряхните флаконы и используйте растворы в ИФА.

Жиры животного происхождения

1.Берется усредненная навеска из разных мест исследуемого образца массой 40 г, которая делится на 2 части по 20г каждая. Пробы механически измельчаются и раста-пливаются. В одну из частей вносится 200 мкл калиброванного раствора исследуемого стероида (400 мкг/мл) для оценки эффективности экстракционной процедуры. Пробы, тщательно встряхиваются.

2.По 200 мг полученных подогретых до жидкого состояния гомогенатов переносят пипеткой в полиэтиленовые пробирки и добавляют по 2 мл дизтилового эфира, плотно закрывают крышками, тщательно встряхивают в течение 5-10 минут и выдерживают в морозильной камере или сухом льде до замерзания водной(нижней) фазы.

3.Прозрачную эфирную фазу каждого образца сливают в пенициллиновые флаконы и выпаривают досуха на водяной бане с температурой воды +37° С в вытяжном шкафу (необходимо следить, чтобы эфир не выплескивался) .

4. К прогретым (+56° С) сухим остаткам экстрактов добавляют по 2 мл растворителя для анализируемых проб, пробы тщательно перемешивают в течение 2-3 минут и охлаждают 15 минут при +4° С.

5. Очистка образцов от жира производится путем фильтрации через бумажные фильтры, фильтраты, используются в ИФА.

6. Пронумеруйте 3 чистых флакона.: 1- x1; 2- y1 ; 3- z1 .

- в 1-й внесите 60 мкл фильтрата, полученного после экстракции нативного анализируемого образца (x1);

- во 2-й внесите 60 мкл фильтрата анализируемого образца с добавкой гормона, внесенного до экстракции (y1) ;

- в 3-й (z1) внесите 60 мкл фильтрата, полученного после экстракции нативного анализируемого образца (x1); сюда же добавьте 60 мкл калиброванного раствора кортизола, содержащего 400 нг/мл гормона ;

- в 1 и 2 флаконы внесите по 390 мкл Промывочного буфера, в 3-й внесите 330 мкл Промывочного буфера, осторожно встряхните флаконы и используйте растворы в ИФА.

Молоко и кисломолочные продукты

1. Берутся в стеклянные виалы 2 навески образцов массой по 60 г (мл) каждая, прогреваются при +37° С в течение 30 минут. В одну навеску вносится 20 мкл калиброванного раствора кортизола (400 мкг/мл) для оценки эффективности экстракционной процедуры. Пробы тщательно встряхиваются .

2. По 3 г(мл) полученных гомогенатов переносят в полиэтиленовые пробирки и добавляют тройной по отношению к гомогенату объем дизтилового эфира (9 мл), плотно закрывают крышками, тщательно встряхивают в течение 5-10 минут и центрифугируют в течение 15 минут при 3ОООg, а затем выдерживают в морозильной камере или сухом льде до замерзания водной (нижней) фазы.

3.Прозрачную эфирную фазу каждого образца аккуратно сливают в пенициллиновые флаконы и выпаривают досуха на водяной бане с температурой воды +37° С в вытяжном шкафу (необходимо следить, чтобы эфир не выплескивался).

4. К прогретым (+56° С) сухим остаткам экстрактов добавляют по 1 мл растворителя для анализируемых проб. Пробы тщательно перемешивают в течение 2-3 минут и охлаждают 15 минут при +4° С.

5. Очистка образцов от жира производится путем фильтрации через бумажные фильтры, фильтраты используются в ИФА.

6. Пронумеруйте 3 чистых флакона: 1- x1; 2- y1; 3- z1.

- в 1-й внесите 60 мкл фильтрата, полученного после экстракции нативного анализируемого образца (x1);

- во 2-й внесите- 60 мкл фильтрата анализируемого образца с добавкой гормона, внесенного до экстракции (y1) ;

- в 3-й (z1) внесите 60 мкл фильтрата, полученного после экстракции нативного анализируемого образца (x1); сюда же добавьте 60 мкл калиброванного раствора кортизола, содержащего 400 нг/мл гормона ;

- в 1 и 2 флаконы внесите по 390 мкл Промывочного буфера, в 3-й внесите 330 мкл Промывочного, буфера, осторожно встряхните флаконы и используйте растворы в ИФА.

7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

7.1. Порядок маркировки планшета и внесения образцов приведен на схеме. Время внесения образцов в лунки одного планшета не должно превышать 15 мин.

7.2. Вскрыть упаковку со стрипами (с планшетом) и внести во все используемые для работы лунки по 300 мкл Промывочного буфера.

7.3. Удалите содержимое переворачиванием планшета или отсасыванием так, чтобы в лунке не осталось жидкости.

7.4. В лунки 1,2. ряда А внести по 150 мкл калибровочной пробы, содержащей Стандарт 0 нг/мл.

7.5. В лунки 1,2 ряда В внести по 150мкл калибровочной пробы, содержащей Стандарт 9,0 нг/мл.

7.6.В лунки 1,2 рядб С внести по 150 мкл калибровочной пробы, содержащей Стандарт 30,0 нг/мл.

7.7. В лунки 1,2 ряда d внести по 150 мкл калибровочной пробы, содержащей Стандарт 90,0 нг/мл.

7.8. В лунки 1,2 ряда Е внести по 150 мкл калибровочной пробы, содержащей Стандарт 300,0 нг/мл.

7.9. В лунки 1,2 ряда f внести по 150 мкл калибровочной пробы, содержащей Стандарт 720,0 нг/мл.

7.10.В лунки 1,2 ряда g внести по 150 мкл образца и флакона x1.

7.11.В лунки 1,2 ряда Н внести по 150 мкл образца из флакона y1.

7.12.В лунки 3,4 ряда А внести по 150 мкл образца из флакона z1.

7.13. Во все используемые лунки планшета внести по 50 мкл раствора Конъюгата.

7.14. Планшет закрыть крышкой или клеящей бумагой и инкубировать планшет в течение 30 минут в вибротермостате при температуре +37° С.

7.15. После окончания времени инкубации жидкость из лунок удалить переворачиванием планшета или отсасыванием. Немедленно внести во все лунки планшета по 300 мкл Промывочного буфера, после чего жидкость из лунок вновь немедленно удалить переворачиванием планшета или отсасыванием. Процедуру повторить еще 4 раза. После последней промывки а лунках не должно содержаться жидкости.

7.16. Во все используемые лунки планшета внести по 100 мкл раствора Хромогена и инкубировать в течении 7-15 минут при температуре +37° С а термостате.

7.17. Во все используемые лунки планшета к раствору Хромогена добавить по 100 мкл Стоп-реагента для остановки ферментативной реакции. Окраска стабильна в течении 30 ммнут.

7.18. Измерить оптическую плотность (ОП) всех лунок планшета на фотометре вертикального сканирования при длине волны 450 нм не позднее 30 минут после остановки ферментативной реакции.

СХЕМА ВНЕСЕНИЯ ОБРАЗЦОВ

8. РАСЧЕТЫ И ГРАФИЧЕСКИЕ ПОСТРОЕНИЯ

Оптическую плотность (ОП) субстратного раствора после остановки Ферментативной реакции измеряют на спектрофотометре "Униплан" производства ЗАО " ПИКОН" или на иммуноферментном оборудовании аналогичного класса при длине волны 450 нм. Программное обеспечение прибора позволяет получать результаты измерений в виде графического построения калибровочной кривой и конечных концентраций кортизола в анализируемых образцах. При использовании приборов с отсутствием программного обеспечения обработки результатов, необходимо провести графические построения и расчеты концентраций кортизола вручную. Для этого необходимо:

а) Вычислить среднее арифметическое значение ОП лунок, содержащих одни и те же стандарты или пробы: 1А и 2А ;1В и 2В;1С и 2С и т.д.

б) Разделить полученные значения ОП калиброванных стандартов и неизвестных проб ( Вх ) на полученное значение ОП в О стандарте (Во) и умножить полученные величины на 100% .

в) Построение калибровочной кривой. Калибровочную кривую строят на полулогарифмической бумаге, откладывая по оси абсцисс (логарифмическая) концентрации кортиэола (нг/мл), а по оси ординат (линейная) полученные значения Вх /Во х 100% в калибровочных стандартах. Для определения содержания кортизола в исследуемой пробе необходимо, расcчитать величину Вх/Во х.100% для данной пробы и, по калибровочной кривой установить концентрацию кортизола. Типичная калибровочная кривая,. представлена на рис. полученная с использованием набора ИфА-Аф-Корт.

г). Расчет коэффициента выхода гормона (Кв)

Расчет проводится после определения конечных концентраций кортизола в анализируемых образцах x,y,z (в нг/мл).

      y - Х

Кв= --------------

        Х

д). Расчет коэффициента неспецифического влияния компонентов анализируемых проб на специфическую реакцию связывания, кортизола антителами.

           z(нг/мл)

Кнесп. -----------------------

        400 (нг/мл) + Х

Если Кнесп. > 1 , то это свидетельствует о наличии в образцах стероидов или других соединений, ингибирующих специфическую реакцию.

ПРОДУКТЫ ЖИВОТНОГО ПРОИСХОДДЕНИЯ, У КОТОРЫХ ЗНАЧЕНИЕ Кнесп. ПРЕВЫШАЕТ 1,15 НЕ РЕКОМЕНДУЕТСЯ УПОТРЕБЛЯТЬ В ПИЩУ ДО ИДЕНТИФИКАЦИИ ОБНАРУЖЕННЫХ СОЕДИНЕНИЙ; ПРИ ЭТОМ НЕОБХОДИМО ИСКЛЮЧИТЬ НАЛИЧИЕ АЦЕТАТА. ГЕМИСУКЦИНАТА ГИДРОКОРТИЗОНА ИЛИ ПРЕДНИЗОЛОНА В АНАЛИЗИРУЕМЫХ ОБРАЗЦАХ.

е). Расчет истинной концентрации гормона в анализируемом образце (нг/мл):

               Х

Кист . ^{= ---------------------------------------------------}

               Кв x Кн е с п .

ж).Расчет истинной концентрации гормона в 1 килограмме анализируемого образца (мг/кг):

- Концентрация кортизола в мг/кг мясных продуктов, творога, сыра рассчитывается путем деления полученной величины kист. на 1000.

- Концентрация кортизола в мг/кг масла и жиров животного происхождения рассчитывается путем деления полученной величины Кист. на 100.

- Концентрация кортизола в мг/кг молока и кисломолочных продуктов рассчитывается путем деления полученной величины Кист. на 3000.

ДОПУСТИМЫЕ УРОВНИ КОРТИЗОЛА

Для всех вышеперечисленных продуктов допускается уровень кортизола не более 0.4 мг/кг . В случае превышения уровня кортизола в анализируемом образце более, чем на 15%, данный продукт не рекомендуется к употреблению в пищу.

9.АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА

9.1. Диапазон измеряемого содержания кортизола составляет 9,0 -720,0 нг/мл.

Специфичность анализа. Перекрестная реакция антисыворотки к кортизолу со структурно-родственными стероидами приведена в таблице 2

Таблица 2

9.3. Минимальное содержание кортизола, определяемое с помощью набора ИФА-АФ-Корт. составляет 4,5 нг/мл.

9.4. Тест на "линейность". Зависимость содержания кортизола от разведения калибровочных проб находится в диапазоне 85-115 %.

Воспроизводимость результатов. Коэффициент

вариации результатов измерения содержания кортизола в образ-

цах, полученных с помощью набора ИФА-Аф-Корт., не превышает 12 %.

9.6. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора ИФА-АФ-Корт.уточнить значения содержания кортизола, соответствующие нормальным.

10. ПОРЯДОК ПРЕДСТАВЛЕНИЯ РЕКЛАМАЦИЙ

Рекламации на наборы реагентов для количественного определения кортнзола в продуктах животного происхождения методом иммуноферментно-го анализа направляют во Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ) (123022, г. Москва, Д-22, Звенигородское шоссе, д.5), предприятию-изготовителю и в Центральную научно-методическую лабораторию (ЦНМВЛ) (111622,г. Москва, улица Оранжерейная, дом 23) в соответствии с указанием ГУВ Минсельхоза России n 22-7/28 от 08.05.92 г.

“О порядке предъявления рекламаций на ветпрепараты отечественного производства и закупаемые по импорту”; одновременно с рекламацией в адрес ВГНКИ направляют одну тест-систему.

Наставление разработано:

ТОО "М.А.В." (Н.Г.Матрешина, А.В.Матрешин) и Центральной научно-методической ветеринарной лабораторией (В.А. Седов).