МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ (Минсельхозпрод России) ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИИ 16.09.98г. n13-7-2/1392 ВРЕМЕННОЕ НАСТАВЛЕНИЕ по применению набора для диагностики лептоспироза животных в реакции латекс-агглютинации (в порядке широкого производственного испытания с 01.09.1998 по 01.09.2000г.) 1. Общие положения 1.1. Антиген латексный поливалентный используют для диагностики лептоспироза в реакции агглютинации на стекле путем выявления специфических антител в сыворотке крови исследуемых животных, инфицированных лептоспирами следующих серогрупп: pomona, canicola, grippotyphosa, icterohaemorrhagiae, sejroe, hebdomadis, tarassovi. 1.2. Антиген латексный поливалентный представляет собой жидкость голубого или белого цвета, состоящую из полистирольных латексных частиц, сенсибилизированных полисахаридной фракцией ЛПС из клеток лептоспир упомянутых серогрупп, в глициновом буфере. При хранении препарата латексные частицы выпадают в осадок, легко разбивающийся при встряхивании в гомогенную взвесь. 1.3. В состав набора входит: - антиген латексный поливалентный для диагностики лептоспироза -7 флаконов (по 20,0 куб.см); - сыворотка агглютинирующая лептоспирозная - 1 ампула (1куб.см); - сыворотка кроличья нормальная - 1 ампула (1 куб.см). 1.4. На флаконах с диагностикумом должны быть этикетки с указанием наименования препарата "Антиген латексный поливалентный для диагностики лептоспироза", на ампуле с сывороткой агглютинирующей лептоспирозной - "Сыворотка агглютинирующая лептоспирозная", на ампуле с кроличьей нормальной сывороткой - "Сыворотка кроличья нормальная". На этикетках должен быть указан номер серии, объем препаратов, срок годности, рабочее разведение. 1.5. На коробке с набором для диагностики лептоспироза животных в реакции латекс-агглютинации должно быть указано наименование и товарный знак предприятия-изготовителя, полное наименование набора, номер серии, номер контроля, количество флаконов (ампул) каждого компонента в коробке, объем компонентов в одном флаконе (ампуле), дата изготовления (месяц, год), срок годности, условия хранения и обозначение ТУ. 1.6. Флаконы (ампулы) без этикеток, с трещинами, с нарушенной укупоркой, содержащие неразбивающийся при встряхивании осадок, подвергшееся замораживанию, а также неиспользованные в день открытия, выбраковывают. 1.7. Каждый набор рассчитан на проведете 100 анализов. 1.8. Набор для диагностики лептоспироза хранят при температуре от 2 до 10°С в темном сухом месте. Срок годности -12 мес. 2. Постановка реакции 2.1. В реакции агглютинации (РА) на стекле с антигеном латексным поливалентным исследуют сыворотку крови животных, в соответствии с ветеринарными правилами ВП 13.3.1310-96 "Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных", г.Москва, 1996г. 2.2. Сыворотку крови животных разводят стерильным физиологическим раствором в соотношении 1:25, 1:50, 1:100; сыворотку крови абортированного (мертворожденного) плода - 1:5 и 1:10. На сухое обезжиренное предметное стекло наносят 0,05 куб.см сыворотки каждого разведения и добавляют 0,01 куб.см антигена латексного поливалентного, флакон которого перед использованием встряхивают до получения гомогенной взвеси. Для постановки реакции используют автоматические пипетки или микропипетки. Компоненты реакции тщательно смешивают стеклянной палочкой и предметное стекло помещают на грелку-качалку с температурой нагрева 37-38°С на 5 минут. Контролем служат: 1) смесь антигена латексного поливалентного и сыворотки агглютинирующей лептоспирозной любой из серогрупп производства Армавирской биофабрики (положительный контроль), 2) смесь латексного антигена и сыворотки кроличьей нормальной (отрицательный контроль). В обоих случаях антигена берут 0,01куб.см, а сыворотки - 0,05куб.см. 2.3. Реакцию считают положительной, если в течение 5 мин. в смеси исследуемой сыворотки и антигена латексного поливалентного образуется хорошо заметный агглютинат (хлопья) голубого или белого цвета, а в жидкости отмечают просветление. 2.4. Животные считаются инфицированными лептоспирами при наличии положительной реакции в титре 1:50 у невакцинированных и 1:100 и выше у вакцинированных. 3. Порядок предъявления рекламаций В случае несоответствия препарата требованиям, указанным в настоящем наставлении, а также при проявлении неспецифической реакции, применение данной серии антигена латексного поливалентного прекращают и сообщают предприятию-изготовителю - НПФ "Диавак" (142279, пос. Оболенск, Серпуховского р-на, Московской обл.), Всероссийскому государственному научно-исследовательскому институту контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов Министерства сельского хозяйства и продовольствия РФ (123022, Москва, Звенигородское шоссе, 5) и Центральной научнометодической ветеринарной лаборатории (111622, Москва, ул. Оранжерейная, 23) в соответствии с существующим Положением "О порядке предъявления рекламаций на ветпрепараты отечественного производства и закупаемые по импорту". Одновременно во ВГНКИ направляют по три невскрытых флакона каждой серии латексного диагностикума. Наставление разработано НПФ "Диавак". Одобрено Советом по ветеринарным препаратам 18.06.1998г., протокол № 3, № 000686-ОП. Начальник отдела ветеринарпо-санитарной экспертизы и лабораторной работы В.И.Белоусов