Наставление
по применению среды питательной
ФАСТ-ЗЛ для диагностики туберкулеза
1.ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
2.ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ
3.ПОРЯДОК ПРЕДЪЯВЛЕНИЯ РЕКЛАМАЦИЙ
МИНИСТЕРСТВО
СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА
И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ
РОСcИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
(Минсельхозпрод России)
ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИИ УТВЕРЖДАЮ
Заместитель руководителя
Департамента ветеринарии
№ 13-7-2/1556 от 07 апреля 1999 г. В.В.Селиверстов
НАСТАВЛЕНИЕ
по применению среды питательной
ФАСТ-ЗЛ для диагностики туберкулеза
1.ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
1.1.Среда питательная ФАСТ-ЗЛ состоит из веществ органической и неорганической
природы и предназначена для культурального исследования биоматериала на
туберкулез.
1.2.Среду выпускают в лиофилизированном виде во флаконах и в нативном виде в
пробирках. Лиофилизированную среду потребитель использует для приготовления
плотной питательной среды нативная среда готова к применению без дополнительных
манипуляций. Сухая питательная среда расфасована по 50 куб.см во флаконы
вместимостью 200 куб.см, а нативная - по 5 куб.см в стеклянные
пробирки. Допускается другая фасовка, согласованная в установленном порядке.
1.3.По внешнему виду лиофилизированная среда представляет собой
крупнокристаллическую массу зеленого цвета с мелкокристаллической пленкой серо-
белого цвета на поверхности,без признаков расплавления и посторонних включений.
Среда нативная - это плотная однородная масса зеленого цвета в виде «косячка» в
нижней части пробирки, с гладкой поверхностью и возможным незначительным
количеством жидкости на дне пробирки.
1.4.На флаконах должна быть наклеена этикетка с указанием наименования
предприятия-изготовителя и его товарного знака, наименования среды (среда ФАСТ-
ЗЛ лиофилизированная), количества доз среды, получаемого после ее растворения
(13 доз), даты изготовления, номера серии номера контроля, срока годности,
условий хранения, обозначения ТУ.
Флаконы с лиофилизированной средой упаковывают в ящики дощатые или из
гофрокартона с перегородками, внутрь каждого ящика вкладывают наставление по
применению среды из расчета одно наставление на пять флаконов.
1.5.Пробирки с нативной средой устанавливают в вертикальном положении по 50-100
штук в полиэтиленовые пакеты с этикеткой, обозначающей наименование предприятия-
изготовителя и его товарный знак, наименование среды (среда ФАСТ-ЗЛ), количество
пробирок со средой, дату изготовления, номер серии, номер контроля, срок
годности, условия хранения, обозначение ТУ В каждый пакет вкладывают наставление
по применению среды.
1.6. Среду ФАСТ-ЗЛ лиофилизированную хранят в сухом темном месте при температуре
не выше 8°С в течение 12 месяцев со дня изготовления.
Нативную среду в пробирках хранят в вертикальном положении в запаянных
полиэтиленовых пакетах в сухом темном месте при температуре от 2 до 8° С. Срок
хранения нативной среды не более 3 мес. со дня изготовления.
1.7. При отсутствии маркировки (этикетки), нарушении целостности флаконов
(пробирок), изменении цвета и консистенции среды, наличии примесей, а также при
неполном растворении лиофилизированной среды - флаконы (пробирки) с такой средой
бракуют.
2. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ
2.1. Для приготовления плотной питательной среды во флаконы с лиофилизированной
средой вливают по 58,3 куб.см стерильной дистиллированной воды рН=7,0, энергично
встряхивают и помещают в термостат с температурой нагрева (37,5±0,5)° С на 30
мин. с периодическим встряхиванием. Лиофилизированная среда должна полностью
раствориться и представлять собой одно-
родную жидкость светло-зеленого цвета.
2.1.1. Немедленно после растворения сухой среды ее разливают при периодическом
встряхивании флакона в стерильные бактерилогические пробирки по 5 куб.см и
укупоривают стерильными ватно-марлевыми пробками.
2.1.2. Пробирки в наклонном положении помещают в термостат с температурой
нагрева 85°С на 30 мин для свертывания среды.
2.1.3. Затем пробирки в том же положении выдерживают в термостате при
температуре (37,5±0,5)° С в течение 18-20 час. и повторно прогревают при
температуре 85°С в течение 20 мин.
2.2. Исследуемый материал после соответствующей обработки высевают на 5-10
пробирок среды. Посев проводят платиновой петлей, осторожно втирая посевной
материал по всей поверхности питательной среды, или пастеровской пипеткой.
При посеве материала платиновой петлей и отсутствии жидкости на дне пробирки,
пробки сразу парафинируют и пробирки устанавливают в термостат с температурой
нагрева (37,5±0,5)° С. Пробирки, засеянные пастеровской пипеткой, помещают в
термостат на двое суток в наклонном положении, при котором жидкость покрывает
поверхность среды. Затем посевы просматривают. Пробирки с восстановленным цветом
среды устанавливают в термостат вертикально. После испарения жидкости в
пробирках, пробирки парафинируют.
Если цвет среды не восстанавливается или наблюдается обильный рост посторонней
микрофлоры, пробирки выбраковывают и посев исследуемого материала проводят
повторно.
2.3. Посевы инкубируют в течение 30 сут. Для выявления начального роста
микобактерий пробирки с посевами просматривают не реже двух раз в неделю. Рост
микобактерий туберкулеза бычьего и человеческого видов проявляется на 14-22 сут,
птичьего - на 10-12 сут. Атипичные микобактерий вырастают, как правило, в первые
10 сут.
Культуры микобактерий, выросшие на среде ФАСТ-ЗЛ в первые 10 сут. после посева,
дальнейшему исследованию не подлежат, исследуют только непигментированные
культуры микобактерий, выросшие после 10 сут. инкубирования.
2.4. После окончания инкубирования посевов или выбраковки, засеянные пробирки
обеззараживают автоклавированием при 120 гр.С в течение 10 мин или кипятят в
воде с открытыми пробками в течение 20 мин.
3.ПОРЯДОК ПРЕДЪЯВЛЕНИЯ РЕКЛАМАЦИЙ
В случае несоответствия среды ФАСТ-ЗЛ требованиям, указанным в настоящем
Наставлении, использование данной серии среды прекращают и об этом в
соответствии с указанием Главветупра Минсельхоза России от 8 мая 1992 года, №
22-7/28 «О порядке предъявления рекламаций на ветпрепараты отечественного
производства и закупаемые по импорту», сообщают предприятию-изготовителю и
Всероссийскому государственному научно-исследовательскому институту контроля,
стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ). Одновременно в
адрес института направляют 3 флакона (10 пробирок) препарата по адресу: 123022,
Москва, Звенигородское шоссе, 5, ВГНКИ.
Наставление разработано ВГНКИ, Курской биофабрикой и ВНИИБТЖ.
Рекомендовано к регистрации Советом по ветеринарным препаратам 17.12.1998 г.
протокол № 5, № ПВР - i-i.9/00038