Наставление
по применению набора для диагностики
парамиксовирусной инфекции
птиц в РТГА.
1. Общие положения.
2. Порядок применения набора.
3. Порядок предъявления рекламаций.
Приложение.Антигенные взаимоотношения в РТГА между сыворотками
и антигенами набора
МИНИСТЕРСТВО
СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА
И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ
РОСcИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
(Минсельхозпрод России)
ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИИ УТВЕРЖДАЮ
Заместитель руководителя
Департамента ветеринарии
№ 13-7-2/510 от 24 января 1996 г. В.В.Селиверстов
Наставление
по применению набора для диагностики
парамиксовирусной инфекции
птиц в РТГА.
1.Общие положения.
Набор предназначен для лабораторной диагностики парамиксовирусной ин-
фекции птиц в РТГА путем типирования (идентификации) выделенных изо-
лятов, выявления специфических антител в сыворотке крови больных и
переболевших птиц, определения напряженности иммунитета.
1.2.Набор содержит:
по 1 ампуле (1,0 мл) сухих инактивированных антигенов парамиксовиру-
сов (ПМВ) птиц 8 серологических вариантов:
ПМВ-1 - штамм "Н" вируса ньюкаслской болезни;
ПМВ-2 - Курица /СССР/1/86;
ПМВ-3 - Индюк/Висконсин/68;
ПМВ-4 - Утка/Куба/1/82;
ПМВ-6 - Утка/Гонконг/199/77;
ПМВ-7 - Горлица/Теннесси/4/75;
ПМВ-8 - Гусь/Делавер/1053/76;
ПМВ-9 - Горлица/Нью-Йорк/22/78.
по 1 ампуле (0,5 мл) сухих специфических (гипериммунных)сывороток к
ПМВ перечисленных серовариантов;
1 ампулу (0,5 мл) сухой нормальной сыворотки.
По заказу потребителя биопредприятие может изготавливать набор, со-
держащий антиген ПМВ одного из перечисленных (1-4, 6-9) серологиче-
ских вариантов и специфическую сыворотку к нему, или отдельно один из
компонентов (антиген или сыворотку) набора.
1.3.Антигены представляют собой сухую аморфную массу беловато-серого
цвета; сыворотки - сухую мелкопористую массу розовато-желтого цвета.
1.4.На ампулах с компонентами набора должны быть этикетки или (нане-
сены обозначения несмываемой краской) с указанием краткого названия
антигена или сыворотки, количества препарата, титра, номера серии,
номера контроля, срока годности.
1.5. На коробке с набором должна быть этикетка с указанием: наимено-
вания предприятия - изготовителя и его товарного знака, полного на-
звания набора, антигенов и сывороток, их серотипов, титра, количества
ампул каждого препарата, номера серии, номера контроля, даты изготов-
ления, срока годности, условий хранения и обозначения ТУ.
1.6.Набор хранят на предприятии-изготовителе и у потребителя в сухом
темном месте при температуре 2-8 гр.С.
1.7.Гарантированный срок годности набора для диагностики парамиксови-
русной инфекции птиц 18 месяцев со дня изготовления. Допускается ис-
пользование набора по окончании гарантированного срока годности при
условии сохранения активности его компонентов (титр антигенов должен
быть не ниже 1:64, титр сывороток - не ниже 1:80).
2.Порядок применения набора.
2.1.Подготовка компонентов набора к работе:
а) каждую ампулу с антигеном разводят 1,0 мл физиологического раство-
ра (рН 7,2-7,4);
б) каждую ампулу с сывороткой разводят 5,0 мл дистиллированной воды,
получая разведение 1:10. С целью удаления неспецифических ингибиторов
разведенную сыворотку прогревают на водяной бане при 56 гр.С 30 мин.
и обрабатывают в течение 2-3 мин. углекислым газом. Образовавшийся
осадок удаляют центрифугированием в течение 10 мин. при 3000 об/мин.
2.2.Подготовленные таким образом антигены и сыворотки используют в
РТГА, которую ставят общепринятым методом согласно "Методическим ука-
заниям по выделению парамиксовирусов их идентификации и выявлению
специфических антител", утвержденными Главным управлением ветеринарии
Госкомпродзака СССР 06.02.91г.
Допускается хранение разведенных компонентов набора: антигенов в хо-
лодильнике при 2-4 гр.С в течение 3 суток, сывороток в замороженном
виде при однократном замораживании-оттаивании до 1 года.
2.3.Интерпретация результатов:
- идентификацию изолята считают завершенной, если выделенной, если
выделенный вирус взаимодействует со специфической сывороткой набо
ра в титре не менее 1/2-1/4 титра, указанного на этикетке ампулы;
- взаимодействие изолята с сыворотками к ПМВ серологических вариан-
тов указывает на то, что выделенный вирус представляет собой сме-
шанный изолят (в этом случае необходимо подтвердить полученные
данные постановкой перекрестной РТГА с используемыми для идентифи-
кации сыворотками и гомологичными антигенами набора согласно при-
ложению).
- Выявление специфических антител к ПВМ какого-либо серологического
варианта в сыворотках крови в титре 1:8 и выше свидетельствует о
контакте птиц данного стада с этим вирусом;
- Увеличение титра антител в парных пробах сыворотки крови не вакци-
нированной птицы при ретроспективной диагностике не менее чем в 4
раза указывает на циркуляцию данного вируса в стаде и наличие
эпизоотического процесса;
- При оценке напряженности иммунитета у птицы с помощью набора сле-
дует руководствоваться наставлениями по применению использованных
вакцин.
3. Порядок предъявления рекламаций.
3.1.В случае выявления неактивности компонентов набора ( в пределах
гарантированного срока годности)или получения неспецифических реакций
использование препарата (антигена или сыворотки) данной серии прекра-
щают и в соответствии с Указанием " О порядке предъявления рекламаций
на ветпрепараты отечественного производства и закупаемые по импорту",
утвержденные Главным управлением ветеринарии 08.05.92г. сообщают об
этом Всероссийскому государственному научно-исследовательскому инсти-
туту контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов
(123022, Москва, Звенигородское шоссе, д.5, ВГНКИ) и предприятию-
изгготовителю. При этом указывают дату изготовления, номер серии и
номер контроля препарата, а в институт одновременно высылают 4 ампулы
препарата или один невскрытый набор , включающий антиген (сыворотку)
данной серии.
Приложение
Антигенные взаимоотношения в РТГА между сыворотками
и антигенами набора (с, . изготов, )
Антигены/сыв-ки
№ серии
|
ПМВ-1
с.
|
ПМВ-2
с.
|
ПМВ-3
с.
|
ПМВ-4
с.
|
ПМВ-6
с.
|
ПМВ-7
с.
|
ПМВ-8
с.
|
ПМВ-9
с.
|
ПМВ-1 с.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
ПМВ-2 с.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
ПМВ-3 с.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
ПМВ-4 с.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
ПМВ-6 с.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
ПМВ-7 с.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
ПМВ-8 с.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
ПМВ-9 с.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|
.
|