МИНИСТЕРСТВО
СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА УТВЕРЖДАЮ
И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ Заместитель начальника
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Департамента ветеринарии
(Минсельхозпрод России) В.В.Селиверстов
ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИИ
18.03.97г. № 13-7-2/882
НАСТАВЛЕНИЕ
по применению комплемента
сухого для реакции связы-
вания комплемента
1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
1.1. комплемент сухой представляет собой сыворотку крови
морских свинок, стабилизированную сернокислым магнием и высушенную
методом лиофилизации. Предназначен для применения в качестве компо-
нента реакции связывания комплемента (РСК).
По внешнему виду комплемент - кристаллическая масса желтовато-
розового цвета без плесени и посторонней примеси, расфасованная
в ампулы (флаконы) по 2 куб.см.
1.2. На ампулу (флакон) наклеивают этикетку или несмываемой
краской по стеклу наносят: сокращенное наименование препарата
("комплемент для РСК"), номер серии, количество препарата в куб.см,
срок годности.
1.3. Ампулы с комплементом по 10, а флаконы - по 20-25 шт.
укладывают в картонные коробки по ГОСТ 12301 с перегородками, обе-
спечивающими их сохранность. В каждую коробку с ампулами (флакона-
ми) вкладывают наставление по применению комплемента.
На коробку с ампулами (флаконами) наклеивают этикетку, на ко-
торой указывают: наименование предприятия-изготовителя и его товар-
ный знак, полное наименование препарата, номер серии, номер конт-
роля, дату изготовления (месяц, год), титр в гемолитической систе-
ме, количество нативного препарата в ампуле (флаконе) в куб.см, коли-
чество физиологического раствора для растворения содержимого одной
ампулы (флакона) в куб.см, количество доз в ампуле (флаконе) в зави-
симости от титра, количество ампул (флаконов) в колобке, шт.,
срок годности, условия хранения, обозначение действующего стан-
дарта .
1.4. При хранении в упаковке изготовителя в сухом и темном
месте при температуре (2-8 гр.С комплемент годен к употреблению в
течение 2 лет со дня изготовления. По истечении указанного срока
препарат может быть использован при показателе титра не более 0,14.
Титр комплемента, указанный на этикетке коробки с препаратом,
является ориентировочным.
1.5. Перед применением каждую ампулу (флакон) с комплементом
просматривают.
Ампулы (флаконы) с наличием плесени, посторонней примеси,
трещинами стекла, нарушенной укупоркой, без надписей или этикеток,
с измененным внешним видом препарата выбраковывают .
2. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ
2.1. Титрование комплемента проводят перед каждой постановкой
реакции. Отбирают необходимое для данного объема исследований ко-
личество ампул (флаконов) с комплементом (из расчета 1 ампула или
флакон на 250 пробирок реакции в объеме 1,0 куб.см), растворяют пре-
парат в физиологическом растворе рН 6,8-7,2, количество которого
указано на ампуле (флаконе), сливают в одну емкость и осторожно
перемешивают, не встряхивая.
Комплемент должен полностью растворяться в течение
3 мин. с образованием прозрачной, слегка опалесцирующей жидкости
желтовато-розового цвета.
Таким образом получают основной раствор комплемента, который
хранят при температуре (2-б гр.С до постановки реакции. Из этого
раствора готовят разведение 1:20 для титрования.
Комплемент титруют в бактериолитической системе в соответст-
вии с наставлениями по постановке РСК при диагностике той или иной
болезни.
2.2. Количество комплемента для постановки реакции определяют
по формуле
Т * П
Х = ----------, где
20
x - количество комплемента, необходимое для постановки
реакции, куб.см;
Т - титр комплемента в бактериолитической системе;
П - количество пробирок в реакции;
20 - кратность разведения основного раствора комплемента
для титрования
Например: в опыте 200 пробирок, титр комплемента - 0,10. Сле-
довательно, количество основного раствора комплемента для проведе-
ния исследования равно:
0,10 * 200
Х= -------------- = 1,0 куб.см
20
Необходимое количество разведенного комплемента для постанов-
ки реакции равно 40 куб.см (т.е. 0,2 куб.см * 200). Следовательно, к
1,0 куб.см основного раствора комплемента добавляют 39,0 куб.см физиоло-
гического раствора.
2.3. Основной раствор комплемента и его разведения готовят и
используют только в день постановки реакции.
В случае несоответствия комплемента требованиям, указанным в
настоящем Наставлении, снижения активности, специфичности исполь-
зование данной серии препарата прекращают и об этом в соответствии
с указанием Главветупра Минсельхоза России от 8 мая 1992 года,
№ 22-7/28 "0 порядке предъявления рекламаций на ветпрепараты оте-
чественного производства и закупаемые по импорту", сообщают на
предприятие-изготовитель, ЦНПВЛ и во Всероссийский государственный
научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и серти-
фикации ветеринарных препаратов (ВГНКИ), одновременно в адрес ин-
ститута направляют 4 ампулы (3 флакона) препарата (123022, Москва,
Звенигородское шоссе, 5,ВГНКИ).
Наставление разработано ВГНКИ.
Рекомендовало к регистрации в Российской Федерации Госветбио-
комиссией 20 октября 1995 года. Протокол № 4 (ПВР 1.04.0128-95)