МИНИСТЕРСТВО
СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА
И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ УТВЕРЖДАЮ
(Минсельхозпрод России) Заместитель начальника
Департамента ветеринарии
В.В.Селиверстов
ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИИ
23.05.97г. № 13-7-2/959
НАСТАВЛЕНИЕ
по применению набора
антигенов и сывороток
для диагностики гриппа
лошадей
1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
1.1.Набор антигенов и сывороток предназначен для
диагностики гриппа лошадей путем идентификации вновь выделенных
штаммов вируса и исследования сывороток крови лошадей, больных и
переболевших этой болезнью.
1.2.Диагностический набор содержит:
Сухие инактивированные антигены вируса
гриппа лошадей серотипов:
|
Количество ампул (флаконов)
|
А/лошадь-1 (Кэмбридж) 63
|
2
|
А/лошадь-2 (Майами) 63
|
2
|
Сухие гипериммунные кроличьи(куриные)
сыворотки к указанным серотипам вируса
|
по 2 к каждому серотипу
|
Нормальные сыворотки кур (петуха)
|
1
|
1.3. Специфические антигены представляют собой сухую аморфную
массу беловато-серого цвета; специфические сыворотки - таблетки
розовато-кремового цвета.
1.4. Антигены и сыворотки расфасовывают по 1,0 куб.см в ампулы
(флаконы). Ампулы (флаконы) укладывают в картонные или полистироловые
коробки, обеспечивающие неподвижность и целостность ампул (флаконов).
Каждая коробка представляет собой набор антигенов и сывороток
для диагностики гриппа лошадей. В каждую коробку вкладывают настав-
ление по применению.
1.5. НА ампулах(флаконах) должны быть этикетки с указанием:
названия антигенов, сывороток, титр, объем, серотип, дата изготовле-
ния, номер серии.
На коробках с набором указывают: наименование и товарный знак
предприятия-изготовителя, полное название набора, название антигенов
сывороток и их серотипов, количество ампул (флаконов) каждого препа-
рата, входящего в набор, номер серии и контроля, дату изготовления,
срок годности, условия хранения, обозначения ТУ.
1.6. Наборы просматривают на соответствие упаковки и маркировки:
ампулы - на целостность, на соответствие внешнего вида, цвета, на
отсутствие механических примесей. При несоответствии вышеуказанным
требованиям препарат бракуют.
1.7. Набор хранят в сухом темном помещении при температуре
от 2 до 6 гр.С.
1.8. Срок годности набора 12 месяцев со дня изготовления.
2. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
2.1. Антигены в ампулах(флаконах) разводят физиологическим раст-
вором (рН 7,2-7,4) до первоначального объема, то есть добавляют к
содержимому по 1,0 куб.см физиологического раствора. Сухая масса должна
раствориться полностью в течение 3-5 минут и представлять собой гомо-
генную взвесь беловато-серого цвета.
2.2. Сыворотки в ампулах(флаконах) разводят дистиллированной
водой в соотношении 1:10. Сухая сыворотка должна растворяться в те-
чение 3-5 минут и представлять собой прозрачную жидкость розовато-
кремового цвета. Далее разведенную сыворотку прогревают в водяной
бане при температуре 60 гр.С в течение 30 минут и обрабатывают углекис-
лотой (пропускают через сыворотку углекислый газ из аппарата Киппа
или добавляют кусочки сухого льда) в течение 2-3 минут, затем цент-
рифугируют при 1500 об/мин, в течение 5 минут. Надосадочную часть
сыворотки отсасывают для постановки РТГА.
2.3. Приготовленные таким образом антигены и сыворотки используют
в реакции торможения гематглютинации, которую ставят в соответ-
ствии с действующим "Временным наставлением по лабораторной диагнос-
тике гриппа лошадей". Компоненты реакций могут сохраняться в раство-
ренном виде в условиях холодильника при температуре от 4 до 8 гр.С -
24 часа, а 1%-ную суспензию эритроцитов - до 3-4 суток.
2.4. Работу с двумя различными антигенными серотипами вируса
гриппа лошадей проводят строго индивидуальными пипетками.
2.5. Идентификацию возбудителя считают завершенной, если диагнос-
тическая сыворотка набора тормозит гемагглютинирующую активность
полевого штамма в пределах целого или 1/2 - 1/8 титра.
2.6. Штаммовую принадлежность вируса, вызвавшего заболевание,
считают установленной, если испытуемая сыворотка тормозит гемагглю-
тинирующую активность диагностического антигена в пределах целого
или 1/2-1/8 его титра с гомологичной диагностической сывороткой.
При постановке РТГА сыворотка к штамму А/лошадь-2/Майами/63
не должна давать торможение гемагглютинации с антигеном А/лошадь-1
/Кэмбридж/63 в разведении выше, чем 1:20, а сыворотка А/лошадь
-1/Кэмбридж/63 - с антигеном А/лошадь-2/Майами/63 в разведении
выше 1:10.
2.7. В случае слабой активности антигена и сывороток
или получения неспецифических реакций применение препаратов данной
серии прекращают и в соответствии с указанием Главного ветеринарного
управления Минсельхозпрода России от 8 мая 1992 года № 22-7/28 "О
порядке предъявления рекламаций на ветпрепараты отечественного производ-
ства и закупаемые по импорту", сообщают об этом предприятию-изготовителю,
Всероссийскому государственному научно-исследовательскому институту конт-
роля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (123022, г.Москав,
Звенигородское шоссе, 5 ВГНКИ) и ЦНПВЛ.
При наличие невскрытых наборов с препаратами данной серии один набор направляют
с нарочным во Всероссийский государственный научно-исследовательский институт
контроля, стандартизации и сертификации ветпрепаратов.
С утверждением настоящего наставления на территории Российской Федерации не
действует "Наставление по применению набора антигенов и сывороток для лабораторной
диагностики гриппа лошадей", утвержденное Государственной комиссией Совмина СССР
по продовольствию и закупкам 26.06.91г.
Рекомендовано к регистрации Госветбиокомиссией 20 октября 1995 года, протокол №4,
ПВР 1.04.0118-95