Наставление
по применению набора для диагностики
респираторного микоплазмоза птиц в
реакции агглютинации ( РА )
1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
2. ВЗЯТИЕ И ПОДГОТОВКА МАТЕРИАЛА
3. ПОДГОТОВКА НАБОРА И ОБОРУДОВАНИЯ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
4. ПОСТАНОВКА И УЧЕТ РЕАКЦИИ
МИНИСТЕРСТВО
СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА
И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИИ УТВЕРЖДАЮ
Заместитель начальника
20.08.97г. n 13-7-2/1035 Департамента ветеринарии
В.В.Селиверстов
НАСТАВЛЕНИЕ
по применению набора для диагностики
респираторного микоплазмоза птиц в
реакции агглютинации ( РА )
1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
1. 1. Набор для диагностики респираторного микоплазмоза птиц
в реакции агглютинации (РА) предназначен для прижизненной диаг-
ностики респираторного микоплазмоза птиц (М. галлисептикум-инфек-
ции) , определения степени инфицирования стада и контроля результа-
тов оздоровительных мероприятий в реакции агглютинации (РА).
1.2.Набор содержит:
- жидкий антиген микоплазма галлисептикум из штамма "С6" -5
флаконов по 10 мл;
- лиофиляэированную положительную к штамму "С6" сыворотку
крови - 1 ампулу (флакон,) по 1мл;
- лиофилизированную отрицательную сыворотку крови кур 1 - ам-
пулу (флакон) по 1 мл.
1. 3. Антиген представляет собой жидкость синего цвета с фи-
олетовым оттенком, состоящую из взвеси обезвреженных микробных
клеток, выпадающих при хранении в легко разбивающийся осадок. По-
ложительная и отрицательная сыворотка крови представляет собой
сухую гомогенную массу беловато-желтого цвета, иногда с розовым
оттенком.
1.4. На флаконы ( ампулы ) наклеивают этикетки с указанием
наименования и количества компонента во флаконе ( ампуле ),
номера серии, даты изготовления, активности и срока годности
( число, месяц, год ).
1.5. Флаконы с антигеном и ампулы с сыворотками крови упако-
вывают в картонные коробки с наличием перегородок, обеспечивающих
неподвижность и целостность препаратов.
В каждую коробку с набором диагностикумов вкладывают настав-
ление по применению.
1.6. На каждую коробку с набором наклеивают этикетку на ко-
торой указывают: наименование и товарный знак предприятия-изгото-
вителя, полное название набора, наименование и количество флако-
нов (ампул) с антигеном и сыворотками крови, номер серии, номер
контроля, количество компонента во флаконе и ампуле, активность,
дату изготовления, срок годности, условия хранения и обозначение
технических условий.
1.7. Ампулы, флаконы без этикеток, с трещинами, с нарушенной
упаковкой, с изменением консистеции и цвета препарата, с неразби-
воющимся осадком подлежат выбраковке, обеззараживанию (20 мин в
О,Э% растворе едкого натра ) и утилизации.
1.8. Срок годности антигена и контрольных сывороток крови 12
мес. со дня изготовления при условии хранения в сухом месте при
температуре 2-8 гр.С.
2. ВЗЯТИЕ И ПОДГОТОВКА МАТЕРИАЛА
2.1. Исследованию подвергают 1-З% стада кур и индеек в воз-
расте от 1 мес и старше в подозреваемых и неблагополучных по ми-
коплазмозу птиц хозяйствах.
2.2. Для постановки РА кровь берут до кормления птицы в ко-
личестве 1,5-2 мл из подкрыльцовой вены от каждой птицы в отдель-
ные пробирки, предварительно увлажненные физиологическим раство-
ром. Пробы крови выдерживают при температуре 18-22 гр.С 1- 1,5 ч. для
свертывания, затем отделяют сгусток от стенки пробирки и помещают
на 10-15 ч. в холодильник (4-8 гр.С) для отделения сыворотки.
3. ПОДГОТОВКА НАБОРА И ОБОРУДОВАНИЯ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1 Флаконы с антигеном перед применением тщательно встря-
хивают и используют в течение 2-х недель ( при условии хранения
от 4 до 8 гр.С ).
3.2. Контрольные сыворотки крови разводят дистиллированой
водой до первоначального объема, т.е. добавляют 1 мл дистиллиро-
ванной воды. Разведенные сыворотки хранят при температуре 4-8 гр.С в
течение 7 сут.
4. ПОСТАНОВКА И УЧЕТ РЕАКЦИИ
4.1. Реакцию агглютинации ставят на хорошо вымытых, обезжи-
реных и вытертых насухо предметных стеклах, на которые наносят
глазной пипеткой рядом две капли ( 0,1 мл ) антигена, а другой
пипеткой между ними - одну каплю ( 0,05 мл ) сыворотки крови.
После взятия каждой пробы сыворотки крови пипетку промывают физи-
ологическим раствором. Компоненты реакции ( антиген и испытуемые
сыворотки ) смешивают стеклянной палочкой или покачиванием пред-
метных стекол вручную или на грелке-качалке при температуре 18-ЗОгр.
С. Реакцию учитывают в течении 2 мин. после соединения компонен-
тов.
4.2. Одновременно ставят контроль антигена с положительной и
отрицательной сыворотками крови. Антиген должен давать положи-
тельную РА с положительной сывороткой крови в течение 1 мин. и от-
рицательную - с отрицательной сывороткой крови кур. Реакции при
постановке контролей, полученные после 1 мин., считают неспецифи-
ческими.
4.3. Положительная РА характеризуется образованием компакт-
ных сгустков (хлопьев) и полным просветлением смеси реаген-
тов. При отрицательной реакции смесь остается без изменений.
4.4. Оценку результатов производят с учетом следующих рас-
четов:
Количество серологических
исследований
|
Количество положительных проб
|
Зараженность поголовья
(в %)
|
20
|
14
|
100
|
20
|
2
|
40
|
30
|
2
|
30
|
40
|
2
|
20
|
100
|
5
|
10
|
4.5.В случае несоответствия компонентов Набора требованиям
по активности и специфичности или получении неспецифической реак-
ции, применение диагностикума данной серии прекращают и а соот-
ветствии с указанием Главветуправления Минсельхоза России от
8 мая 1992года № 22-7/28 "О порядке предъявления рекламаций на
ветпрепараты отечественного производства и закупаемые по импорту"
сообщают предприятию-изготовителю Всероссийскому Государствен-
ному научно-исследовательскому институту контроля,стандартизации и
сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ,Москва,123022,Зве-
нигородское шоссе,5)и ЦНПВЛ.
При наличии невскрытых наборов один набор упаковывают, опе-
чатывают и направляют с нарочным во ВГНКИ.
С утверждением Наставления на территории Российс-
кой Федерации прекращают действовать "Методические указания по
применению набора для диагностики респираторного микоплазмоза
птиц в реакции агглютинации (РА);утвержденные 07 марта 1989года.
Наставление разработано Всероссийским научно-исследователь-
ским ветеринарным институтом птицеводства (ВНИВИП) (189510,
г.Санкт-Петербург,Ломоносов,ул.Черникова,3) и Всероссийским
государственным научно-исследовательским институтом контроля,
стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ).
Наставление рекомендовано к регистрации Ветфармсоветом
Департамента ветеринарии 19.06.97г.протокол №3.ПВР 1.03.0382-97