МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ (Минсельхозпрод россии) ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИИ УТВЕРЖДАЮ Заместитель руководителя 10.06.99г. № 13-4-2/1633 Департамента ветеринарии В.В.Селиверстов МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ по диагностике сферуляриоза шмелей 1. Общие положения 1.1. Сферуляриоз - болезнь маток шмелей, вызываемая гельминтом sphaerularia bombi, самки которого живут в гемоцеле тела насекомого. Заражение происходит при проникновении оплодотворенных самок паразита в тело молодых маток шмеля при их зимовке в почве или хранении маток в холодильниках в загрязненном, не прошедшем обработку материале, взятом из естественных мест зимовок насекомых. Болезнь характеризуется неспособностью маток к закладке гнезд или снижением откладки яиц, непродолжительной жизнью маток. 1.2. Диагноз на сферуляриоз ставят на основании отмеченных признаков болезни при обнаружении паразитов в теле шмеля. 1.3. Для диагностики в лабораторию направляют живых или свежие (не более 1 суток с момента гибели) трупы маток шмелей в чистых стеклянных флаконах, пробирках или картонных коробках. 2. Лабораторные исследования. 2.1. Обездвиженных живых или погибших шмелей кладут спинкой вниз, глазными ножницами делают разрез по средней линии брюшка, осторожно, не повреждая кишечника, отгибают в стороны хитиновые кольца, закрепляя их иглами. Под МБС-1 (МБС-2) или лупой осматривают внутренние органы шмеля, осторожно без повреждения сдвигая их препаровальной иглой. К поверхности органов прикладывают чистое предметное стекло, делая мазок- отпечаток, или во вскрытое брюшко вводят и затем отсасывают небольшую каплю воды, которую переносят на стекло. 2.2. При осмотре внутренних органов иногда на их поверхности можно найти одно или несколько легко снимаемых иглой посторонних белых или желтоватых нитевидных - размером до 1,5-2,0 см, - образований, представляющих собой развитую, заполненную яйцами вывернутую матку сферулярии с прикрепленным к ней телом самого гельминта. При микроскопии (окуляр х5 - х7; объектив х10) мазков-отпечатков капли смыва с внутренних органов под покровным стеклом обнаруживают скопления (от единичных экземпляров до нескольких десятков) овальных размером 105- 120 х 20-50 мкм яиц гельминта, внутри некоторых из них видны свернутые личинки сферулярии; последних также находят в свободном состоянии, они выглядят как тонкие прозрачные, обычно - "С" образно свернутые нити длиной до 1 мм. Методические указания разработаны лабораторией профилактики болезней и экологической охраны пчел Всероссийского научно- исследовательского института экспериментальной ветеринарии (ВИЭВ).